FluorCam zamknięty system obrazowania fluorescencyjnego GFP/Chl.

FluorCamZamknięty system obrazowania fluorescencyjnego GFP/Chl. może obsługiwać szereg badań biologicznych molekularnych i komórkowych stosowanych w białkach zielonych fluorescencyjnych. W zamkniętym systemie obrazowania fluorescencyjnym zainstalowane są koła filtra w pełni sterowane oprogramowaniem i napędzane elektrycznie, a także szereg zestawów filtrów do wykrywania i obrazowania GFP, EGFP, wtGFP, YFP, BFP lub innych białek fluorescencyjnych i fluorescentów pasmowych.

Zamknięty system obrazowania fluorescencyjnego GFP/Chl. FluorCam może być również używany do wykrywania dynamicznych zmian i rozkładu przestrzennego fluorescencji chlorofilowej emitowanej przez rośliny, pomiaru procesów efektu Kautsky'ego, tłumienia fluorescencji i innych procesów fluorescencyjnych chwilowych (przejściowych) oraz dostarczania obrazów fluorescencyjnych dwuwymiarowych. Specjalnie zaprojektowana konfiguracja sprzętowa umożliwia automatyczną konwersję systemu do obrazowania fluorescencyjnego białka, fluorescencji lub fluorescencji chlorofilowej. System jest wysoce zintegrowany i może być dostosowany do ciemności próbki.

Obszary zastosowania:

• Detekcja fluorescencji białek i fluorescentów

• Transfer genów i technologia bioczujników

· Badania nad roślinami zmodyfikowanymi genetycznie

• Testowanie odporności na różne genotypy

Badania interakcji roślin-mikroorganizmów

Badania interakcji roślin-zwierząt

· Właściwości fotosyntezy roślin i przesiewanie zaburzeń metabolicznych

• Wykrywanie przymusu biologicznego i niebiologicznego

Badania roślin o odporności na kompulsję lub wrażliwości

· Badania nierówności otworów

• Badania chaosu metabolicznego

• Ocena wydajności i wydajności

Cechy funkcjonalne:

· Łatwa obsługa, regulacja wysokości próbki pomiarowej, zintegrowana specjalna skrzynka do adaptacji ciemności, ułatwiająca przetwarzanie i obsługę ciemnej adaptacji roślin testowanych itp.

CCD o wysokiej rozdzielczości, rozdzielczość do 1392 x 1040 pikseli, szybkie i precyzyjne uchwycenie fluorescencji chlorofilowej i GFP

Można przeprowadzać automatyczne powtarzalne pomiary obrazu, można ustawić program eksperymentalny (protokoły) automatyczne pomiary obrazu cyklicznego, dane pomiarów obrazu są automatycznie zapisane do komputera według daty czasu (z pieczęcią czasową)

· Z różnymi powszechnymi procedurami eksperymentalnymi (protokołami), takimi jak efekt indukcji Kautsky'ego, analiza wygaszania fluorescencyjnego, pomiar parametrów analizy do ponad 50

Opcjonalny moduł obrazowania kolorowego TetraCam o maksymalnej powierzchni obrazowania 20 x 25 cm do analizy morfologii ostrzi lub roślin

Typowe próbki:

• Lista, łodygi, nasiona, korzenie, cała roślina.

• Uzdrowione tkanki, małe sadzynki w naczyniu petryjskim

• Owoce i kwiaty

• Błękitne bakterie, zielone algi, bakterie

• GMO zwierzęta

Parametry techniczne:

• Parametry pomiaru: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Ponad 50 parametrów fluorescencyjnych chlorofylu, każdy z nich może wyświetlać 2D obraz kolorowy fluorescencji

Kompletny protokół automatycznego pomiaru, umożliwiający swobodną edycję automatycznego programu pomiaru

a) Fv / Fm: parametry pomiarowe obejmują Fo, Fm, Fv, QY itp.

b) Efekt indukowany Kautskym: Fo, Fp, Fv, Ft_Lss, QY, Rfd i inne parametry fluorescencyjne

c) Analiza haszenia fluorescencyjnego: Fo, Fm, Fp, Fs, Fv, QY, ΦII, NPQ, Qp, Rfd, qL itp. Ponad 50 parametrów

d) Krzywa odpowiedzi światła LC: Fo, Fm, QY, QY_Ln, ETR i inne parametry fluorescencyjne

e) Absorpcja PAR i NDVI (opcjonalnie)

f) Dynamika ponownego utleniania (opcjonalna)

g) Statyczne pomiary fluorescencyjne, takie jak GFP

h) Szybka analiza dynamiki fluorescencyjnej OJIP (opcjonalnie): Mo (początkowy nachylenie krzywej OJIP), obszar stały OJIP, Sm (miara energii potrzebnej do zamknięcia wszystkich centrów reakcji światła), QY, PI itp.

Czujnik CCD o wysokiej rozdzielczości TOMI-2

a) Skanowanie CCD

b) Maksymalna rozdzielczość obrazu: 1360 x 1024 pikseli

c) Rozdzielczość czasowa: do 20 klatek na sekundę przy maksymalnej rozdzielczości obrazu

Rozdzielczość konwersji A/D: 16 bitów (65 536 skali szarości)

e) Wymiary: 6,45 µm x 6,45 µm

f) tryb pracy: 1) tryb dynamiczny wideo do pomiaru parametrów fluorescencji chlorofylu; 2) Tryb snapshot do pomiaru białek fluorescencyjnych i barwników fluorescencyjnych, takich jak GFP

g) tryb komunikacji: Gigabit Ethernet

• Płyta światła: 4 duże, wysokiej intensywności opakowane płyty światła LED, każda płyta światła składa się z tablicy LED 8 × 9, efektywny obszar płyty światła jest taki sam jak obszar obrazowania 13 × 13 cm

• Światło pomiarowe: standardowe światło czerwone 617nm, inne pasma są dostępne, czas trwania 10µs – 100µs jest regulowany

• Dwukolorowe światło: 2 czerwone (617nm) + 2 niebieskie (470nm), maksymalna intensywność światła Actinic1 300 µmol (fotony) / m².s, maksymalna intensywność światła Actinic2 2000 µmol (fotony) / m².s; Maksymalna ilość światła optochemicznego do 3000 µmol (fotonów) / m².s

• Nasycony błysk: maksymalna intensywność światła 4000 µmol (fotony) / m².s, można uaktualnić do 6000 µmol (fotony) / m².s

• Powierzchnia obrazu: 13 x 13 cm, do analizy obrazu liści roślin, tkanek roślinnych, glonów, mchów, pokrywów, całej rośliny lub wielu roślin, płyt 96 otworów, płyt 384 otworów itp.

• Moduł pomiaru GFP: 7-bitowe koło filtra i dedykowane filtry do pomiaru GFP (białko zielone fluorescencyjne)

• Moduł pomiaru absorpcji PAR (opcjonalnie): 740 nm daleko czerwonego światła (FAR), 660 nm dwukolorowe diody LED i specjalne filtry do pomiaru absorpcji PAR i NDVI

• QA w analizie obrazowania kinetycznego utleniania (opcjonalnie): można przeprowadzić pomiary w analizie kinetycznej fluorescencji STF z mocą błysku światła jednoobwodowego (STF) do 120 000 µmol (fotonów) / m².s w 100 µs

• Moduł dynamiczny szybkiej fluorescencji OJIP (opcjonalnie): rozdzielczość czasowa do 1 µs, można zmierzyć i analizować krzywą OJIP z ponad dwudziestu powiązanymi parametrami, w tym: Fo, Fj, Fi, P lub Fm, Vj, Vi, Mo, Area, Fix Area, Sm, Ss, N (liczba obrotów redukcji QA), Phi-Po, Psi_o, Phi_Eo, Phi_Do, Phi_pav, ABS/RC (przepływ kwantowy pochłaniania światła w jednostkowym centrum reakcji), TRo/RC (przepływ kwantowy pochłaniania światła w jednostkowym centrum reakcji), ETo/RC (przepływ kwantowy pochłaniania światła w jednostkowym centrum reakcji), DIo/RC (rozproszenie energii w jednostkowym centrum reakcji), ABS/CS (przepływ kwantowy pochłaniania światła w jednostkowym przekroju próbki), TRo/CSo, RC/CSx (gęstość centrum reakcji), PIABS (wskaźnik „wydajności” lub wskaźnik przetrwania oparty na przepływie kwantowym pochłaniania światła), PIcs (wskaźnik „wydajności” lub wskaźnik przetrwania oparty na przekroju)

• Płyta światła UV LED (opcjonalnie): 365 nm lub 385 nm, 1) pomiar wielobornej fluorescencji (patrz system obrazowania wielospektralnego FluorCam); 2) Pomiar wtGFP (białko zielone fluorescencyjne dzikiego typu), DAPI (4',6-diodyl-2-fenylpiper, barwnik fluorescencyjny)

• Niebieska płyta LED (opcjonalnie): 470 nm, 1) pomiar EGFP (wzmocnione zielone białko fluorescencyjne); 2) do badań funkcji pory

• Zielona płyta LED (opcjonalnie): 530 nm, pomiar YFP (żółte białko fluorescencyjne)

* Do pomiaru białek fluorescencyjnych lub barwników fluorescencyjnych, takich jak wtGFP, DAPI, EGFP, YFP, wymagany jest również odpowiedni filtr

• Funkcje oprogramowania do analizy obrazowania fluorescencyjnego FluorCam: menu funkcjonalne Live, Protocols, Pre-processing, Result

• Protokoły dostosowane do potrzeb klienta: można ustawić czas (na przykład czas pomiaru światła, czas trwania światła optochemicznego, czas pomiaru itp.), intensywność światła (na przykład intensywność światła optochemicznego różnej jakości światła, intensywność nasyconego błysku, modulacja pomiaru światła itp.), dedykowany język programu eksperymentalnego i skrypt, a także użytkownicy mogą swobodnie tworzyć nowe programy eksperymentalne za pomocą szablonów kreatora w menu Protokół

• Funkcja automatycznej analizy pomiarów: Można ustawić program eksperymentalny (Protokół) do automatycznego pomiaru obrazu cyklicznego bez opieki, liczba powtarzeń i okres czasu są dostosowane przez klienta, dane pomiarów obrazu są automatycznie zapisywane do komputera według daty czasu (z pieczęcią czasową)

  Tryb snapshot: Można swobodnie regulować intensywność światła, czas zamknięcia i wrażliwość, aby uzyskać wyraźne obrazy fluorescencyjne w stanie stałym i natychmiastowe próbek roślin

• 

• Przetwarzanie wstępne obrazowania: oprogramowanie programowe automatycznie rozpoznaje wiele próbek roślin lub obszarów lub ręcznie wybiera obszar zainteresowania (ROI). Kształt ręcznego wyboru może być kwadratowy, okrągły, dowolny wielokątny lub sektorowy. Oprogramowanie do automatycznego pomiaru i analizy krzywych dynamicznych fluorescencji dla każdej próbki i wybranego obszaru oraz odpowiednich parametrów, niezgraniczona liczba próbek lub obszarów (> 1000)

• Tryb analizy danych: z trybem "przeliczenia sygnału" (średnia liczbowa) i trybem "przeliczenia średniej sygnału", w przypadku wysokiego stosunku sygnału do hałasu wybierz tryb "przeliczenia sygnału" w przypadku niskiego stosunku sygnału do hałasu, aby filtrować błędy spowodowane hałasem

• Wyniki wyjściowe: dynamiczne wykresy fluorescencyjne o wysokiej rozdzielczości czasowej, filmy o dynamicznej zmianie fluorescencji, pliki Excel o parametrach fluorescencyjnych, histogramy, wykresy obrazowania różnych parametrów, listy parametrów fluorescencyjnych z różnymi zwrotami inwestycji itp.

• Szerokość pasma detektora CCD: 400-1000 nm

· System oświetlenia: statyczny lub dynamiczny (sinusowy)

Odpowiedź spektralna: maksymalna wydajność kwantowa (70%) przy 540 nm i 50% redukcja przy 400 nm i 650 nm

Hałas odczytu: poniżej 12eRMS, typowy 10e

Całkowita pojemność pułapki: powyżej 70 000 e (nie zawarte)

Bios: oprogramowanie firmware można uaktualniać

• Sposób komunikacji: Gigabit Ethernet

Rozmiary: 471 mm (W) × 473 mm (D) × 512 mm (H)

Waga: ok. 40 kg

Zasilanie: ok. 1100 W

Napięcie zasilania: 90-240 V

Typowe zastosowania:

Szanghajski Instytut Nauk Biologicznych wykorzystał FluorCam do pomiaru uzyskanego obrazu GFP, na którym rośliny emitujące jasne kolory są roślinami, które wyrażają GFP. Im bardziej ich kolor jest czerwony, tym więcej GFP jest wyrażany.

Kontrolcja koralowca przyciskowego - rozrost w różnych fazach (T1 = 0, T2 = 30, T3 = 60) NDVI i analiza obrazowania GFP (Miguel, 2014)

Pochodzenie: Europa